pH傳感器,用來(lái)檢測(cè)被測(cè)物中氫離子濃度并轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的可用輸出信號(hào)的傳感器。
1、電避免干放,當(dāng)電不用時(shí),要用水沖洗干凈并插回加有3molKcl的盛液套內(nèi),或者將電插入加有3molKcl的容器中。
2、檢查接頭處是否干燥清潔,如有玷污,需用無(wú)水酒擦洗干凈吹干后使用。
3、pH電應(yīng)定時(shí)清洗,若電玻璃泡與聚四氟乙烯環(huán)形液接界污染,可用下列試劑清洗。
① 油脂或含油物可用表面活性劑清洗。
② 鈣沉淀物或金屬氫氧化物可用10%的稀鹽酸清洗。
③ 硫化物沉淀可用10%的稀鹽酸清洗。
④ 蛋白質(zhì)附著物可用10%的稀鹽酸和胃蛋白酶的混合物清洗。
4、ORP電表面應(yīng)該是光亮的,粗糙的或受污染的表面會(huì)影響電的電位??捎靡韵路椒ㄇ逑椿罨?。
1)對(duì)無(wú)機(jī)物污染,可將電浸入0.1mol/L稀鹽酸中30分鐘,用純水清洗,再浸入3.5mol/L溶液中浸泡6小時(shí)后使用。
2) 對(duì)有機(jī)油污和油膜污染,可用洗滌劑清洗鉑金表面后用純水清洗,再浸入3.5mol/L溶液中浸泡6小時(shí)后使用。
3)鉑金表面污染嚴(yán)重形成氧化膜,可用牙膏對(duì)鉑金表面行剖光,然后用純水清洗,再浸入3.5mol/L溶液中浸泡6小時(shí)后使用。
在使用時(shí),通常將PH傳感器加上不銹鋼保護(hù)套,再插入發(fā)酵罐中。大多數(shù)PH傳感器都具有溫度補(bǔ)償系統(tǒng)。由于電內(nèi)容物會(huì)隨使用時(shí)間或溫滅菌而不斷變化,因而在每批發(fā)酵滅菌操作前均需行標(biāo)定,即用標(biāo)準(zhǔn)的PH緩沖液校準(zhǔn)。通常PH傳感器的測(cè)定范圍是0~14,度達(dá)±(0.05~0.1),響應(yīng)時(shí)間為數(shù)秒至數(shù)十秒,靈敏度為0.1。
⑴校準(zhǔn) 在使用前對(duì)傳感器行校準(zhǔn),這是對(duì)發(fā)酵罐行滅菌的操作。傳感器的校準(zhǔn)在發(fā)酵罐外行,將PH電浸沒(méi)到含種或多種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的適當(dāng)容器中行校準(zhǔn)。這些操作均在發(fā)酵罐運(yùn)行溫度下行。PH電需與發(fā)酵過(guò)程中使用的PH計(jì)相連接,PH計(jì)的校準(zhǔn)裝置可按常規(guī)的PH計(jì)校準(zhǔn)步驟來(lái)調(diào)整。由于發(fā)酵過(guò)程中重新校準(zhǔn)的時(shí)分困難或者不可能,能固定PH計(jì)的校準(zhǔn)控制,以避免實(shí)驗(yàn)中的偶發(fā)性偏移,許多商業(yè)性的儀表都提供些固定螺絲。
⑵ 滅菌 校準(zhǔn)以后,應(yīng)該將傳感器插入到發(fā)酵罐中并行密封。在發(fā)酵罐滅菌時(shí),般將PH計(jì)的連接物移開(kāi)(采用壓滅菌鍋滅菌時(shí)),滅菌后重新連接,PH傳感器開(kāi)始作。也有實(shí)驗(yàn)操作人員用酒對(duì)PH傳感器單消毒(即不放入滅菌鍋),主要是為了延長(zhǎng)傳感器的使用壽命。然后需將傳感器立即插入且密封在罐內(nèi)。出,這過(guò)程可能染菌。盡管有些報(bào)道稱在研究中規(guī)則地使用這步驟沒(méi)有問(wèn)題。具體方法如下:放好傳感器,加上個(gè)合適的配件以使PH探頭易于由發(fā)酵罐盤(pán)行安裝,然后將其在無(wú)水酒中至少放置lh。探頭和配件是很干凈的,探頭的浸沒(méi)位置應(yīng)于配件。應(yīng)迅速地將傳感器轉(zhuǎn)移到預(yù)滅好菌的發(fā)酵罐中,其已與空氣供應(yīng)系統(tǒng)相連,而且其中的空氣已開(kāi)始動(dòng)。
⑶ 校準(zhǔn)的檢查 在滅菌或使用過(guò)程中,很可能會(huì)使校準(zhǔn)發(fā)生偏移。對(duì)于狀況良好的傳感器,這種偏移不會(huì)過(guò)0.2個(gè)單位。但些研究人員仍建議在發(fā)酵罐滅菌以后行校準(zhǔn)或者再校準(zhǔn)。目前已有適用于較大發(fā)酵罐的這種系統(tǒng),可以無(wú)菌地取出傳感器,再將其分地插入校準(zhǔn)緩沖液中行校準(zhǔn)。在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模下,有將傳感器移出,利用前述的化學(xué)處理方法來(lái)行再消毒。在實(shí)驗(yàn)室中檢查個(gè)可疑校準(zhǔn)的較好方法是對(duì)發(fā)酵液行無(wú)菌取樣,在發(fā)酵罐外測(cè)量其PH值盡快行檢測(cè)、讀數(shù)。因?yàn)榧?xì)胞在不斷變化的條件下(例如在連續(xù)培養(yǎng)中氧和基質(zhì)的消耗)行連續(xù)代謝,如果培養(yǎng)基的緩沖性能較差,PH在幾分鐘內(nèi)即可發(fā)生顯著變化,從而無(wú)法正確檢查傳感器的校準(zhǔn)。
在實(shí)際使用過(guò)程中,PH實(shí)際使用過(guò)程中,在PH傳感器可能會(huì)存在以下問(wèn)題:靈敏度/斜率下降,響應(yīng)遲緩,噪聲信號(hào)以及化學(xué)破壞。
⑴靈敏度/率斜在PH和探頭的電電位之間存在定的理論關(guān)系(見(jiàn)前述的能斯方程)。新的PH探頭可接近其理論斜率(即25℃下每PH單位的電電位為59mv),但隨著探頭的老化或破壞,靈敏也會(huì)不斷下降。大多的PH計(jì)或放大器能控制并改變其將電壓信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)镻H讀數(shù)的靈敏度(通常標(biāo)記為斜率或靈敏度),可由mv或溫度來(lái)定標(biāo)(因?yàn)闇囟仁抢碚撋嫌绊懶甭实奈┮蛩?。值得注意的是,這不同于"緩沖液設(shè)置"或"零控制"。圖5-9表示了當(dāng)靈敏度控制發(fā)生設(shè)置錯(cuò)誤時(shí)的情況。將系統(tǒng)行某種PH校準(zhǔn)(通過(guò)緩沖液設(shè)置控制)后,再用種或多種緩沖液行檢驗(yàn)。與預(yù)期結(jié)果不同的是,PH計(jì)的讀數(shù)會(huì)系統(tǒng)性地偏離已知緩沖液的PH值,如圖5-9中虛線所示。如果所得到的線陡,說(shuō)明斜率設(shè)置過(guò)低;如果所得的線平緩,則說(shuō)明斜率設(shè)置過(guò)。斜率/靈敏度的控制設(shè)置在低于理論值的PH值,才能使PH探頭能夠按照5-9中所示的實(shí)線來(lái)作(這相當(dāng)于行探頭的兩點(diǎn)校準(zhǔn))時(shí),說(shuō)明該系統(tǒng)的靈敏度較差。
⑵清洗 當(dāng)PH探頭表現(xiàn)出響應(yīng)延遲或靈敏度下降時(shí),就需要對(duì)其行清洗。PH探頭惡化的主要原因是發(fā)酵液中的物質(zhì)污染了多孔塞,多孔塞如果被污染就會(huì)由白色變成褐色或黑色。為防止污染,可將PH探頭浸泡在10mmol.L-1HCl溶液中,這樣不會(huì)損壞PH傳感器(這也可用于運(yùn)行間歇期間常規(guī)保存PH探頭)。有時(shí)添加胃蛋白酶有助于去除蛋白質(zhì)沉淀。如果HCl處理沒(méi)有效果,可以嘗試下面兩種方法,盡管它們具有定的損壞PH探頭的風(fēng)險(xiǎn),但也有定的效果。將PH探頭浸泡于1%左右的H 2O2 溶液中約1~2h;或者對(duì)多孔塞行溫和的機(jī)械清洗,即采用鋒利的刀片刮去外表面的沉積物。
⑶ 電干擾 PH計(jì)的阻抗和放大器線路可能會(huì)產(chǎn)生些問(wèn)題,這使得PH探頭對(duì)由其他電氣設(shè)備的雜散場(chǎng)入口的感應(yīng)電壓帶來(lái)的噪聲敏感,對(duì)由載有PH探頭信號(hào)的兩個(gè)接線柱間微量的電泄漏引起的錯(cuò)誤響應(yīng)也較為敏感。為此PH傳感器或PH計(jì)的制商提供了用的屏蔽導(dǎo)線和接線柱。,如果存在過(guò)量噪聲,可將PH探頭導(dǎo)線從其他電線處移開(kāi)以減少噪聲。攪拌器電機(jī)可能是個(gè)干擾源,這可通過(guò)將電機(jī)關(guān)閉幾秒鐘來(lái)檢查。PH跡線上的尖峰與加熱器電路的開(kāi)或關(guān)相對(duì)應(yīng)(開(kāi)關(guān)可以由燈來(lái)觀察或根據(jù)加熱器控制單元的繼電器切換的聲音來(lái)判斷)。壓滅菌后出現(xiàn)的噪聲或不準(zhǔn)確的讀數(shù),可以反映滅菌過(guò)程中蒸汽冷凝引起的接線柱及導(dǎo)線的污染。
⑷防止機(jī)械破壞PH探頭相當(dāng)易碎,在發(fā)酵罐的安裝和清洗過(guò)程中容易破損。因些建議在發(fā)酵罐準(zhǔn)備的后期再插入PH探頭(需要在這里行校準(zhǔn)),在使用后(下罐)拆卸時(shí)取出PH探頭。傳感器發(fā)生破損的很多情況是由于未取出傳感器就直接提起了發(fā)酵罐的蓋。為了避免探頭在運(yùn)行間歇期間貯存時(shí)產(chǎn)生破損, 個(gè)簡(jiǎn)便方法是將傳感器置于個(gè)塑料量筒內(nèi),該量筒內(nèi)裝有用溶液。選擇合適的量筒尺寸,以使探頭的較寬位也可放入,形檢測(cè)位懸浮在底上方(如可將個(gè)棉塞入量筒底),同時(shí)將量筒用夾子固定
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